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2023年RNA纯化试剂盒操作说明书,菁华1篇(精选文档)

时间:2023-03-14 09:55:02 浏览量:

RNA纯化试剂盒操作说明书1RNACleanupKitRNA纯化试剂盒K0589保存:室温组分说明CatalogK0589KitSize20BufferRL20mlBufferRW2(concent下面是小编为大家整理的2023年RNA纯化试剂盒操作说明书,菁华1篇(精选文档),供大家参考。

2023年RNA纯化试剂盒操作说明书,菁华1篇(精选文档)

RNA纯化试剂盒操作说明书1

RNA Cleanup Kit

RNA纯化试剂盒

K0589

保存:室温

组分说明

Catalog K0589

Kit Size 20

Buffer RL 20 ml

Buffer RW2(concentrate) 11 ml

RNase-Free Water 10 ml

Spin Column RS 20

Collection Tube( ml) 20

Collection Tube(2 ml) 20

产品简介

本试剂盒使用 的离心吸附柱,在高盐条件下 RNA 与硅基质膜高效、专一地结合,适用于从酶促反应及其他多种方法提取的 RNA 溶液中进一步纯化和浓缩 RNA,并将 RNA 样品进行脱盐处理,有效回收得到高纯度的 RNA。该试剂盒最小可以将 RNA 样品浓缩至 30-50 μl,回收得到的 RNA 可直接用于微点阵分析和 Real-time PCR 等敏感实验。

注意事项

预防RNase污染,应注意以下几方面:

1)使用无RNase的塑料制品和枪头,避免交叉污染。

2)玻璃器皿应在使用前于180℃高温下干烤4小时,塑料器皿可在 M NaOH中浸泡10分钟,用水彻底冲洗后高压灭菌。

3)配制溶液应使用无RNase的水。

4)操作人员戴一次性口罩和手套,实验过程中要勤换手套。

Buffer RL 如果产生沉淀,请加热使其溶解后放置。

所有离心步骤均在室温下进行,且所有操作步骤动作要迅速。

自备试剂:无水乙醇(新开封或提取RNA专用)

操作步骤

用 RNA-Free Water 调整样品至总体积至 100 μl,加入 350 μl Buffer RL,充分混匀。

加入 250 μl 无水乙醇,混匀。

将得到的溶液700 μl转移到吸附柱(Spin Column RS)中(吸附柱已装入收集管 2 ml Collection Tube 中),10,000rpm(~11,500 x g)离心20秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。

向吸附柱中加入500 μl Buffer RW2(用前检查已加入无水乙醇), 10,000 rpm 离心20秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。

重复步骤4。

将吸附柱放回收集管中,12,000 rpm离心1分钟。

将吸附柱装入新的RNase-Free 收集管中,向吸附膜的中间部位加入30-50 μl RNase-Free Water,室温放置1分钟,12,000 rpm离心1分钟,得到的RNA溶液保存在-70℃,防止降解。

注意: RNase-Free Water最好在70℃预热,确保RNA洗脱充分;洗脱体积不应小于30 μl,体积过小影响回收率。

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